Диагностика COVID-19: разные системы тестирования преследуют разные цели
Диагностика – важный аспект борьбы с COVID-19
Одним из главных инструментов борьбы с пандемией является качественная и своевременная диагностика заболевания. В 2020 году на территории РФ было зарегистрировано более 150 различных диагностических тестовых систем для диагностики коронавируса и ежемесячно появляются новые. Ускоренная процедура регистрации медицинских изделий, предназначенных для лечения и диагностики коронавируса и отсутствие серьезных препятствий для получения регистрационных удостоверений в условиях пандемии позволили полностью удовлетворить спрос на лабораторную диагностику COVID-19.
Выявление вируса и определение антител
Все классические тесты на SARS-CoV-2 делятся на две большие группы: тесты для обнаружения генетического материала вируса (вирусной РНК) и тесты для определения антител. Для выявления вирусной РНК используют ПЦР-тесты, основанные на полимеразно-цепной реакции. Биологическим материалом для ПЦР-исследования является отделяемое из носоглотки и ротоглотки. Корректность результатов во многом зависит от правильности подготовки пациента к тестированию и техники забора материала. Исследование методом ПЦР длится несколько часов, поэтому результаты могут быть получены в день проведения анализа или на следующий день. Экспресс-тестирование осуществляют тест-системами на основе изотермической амплификации и как правило проводится в аэропортах прилетающим из-за рубежа, а также используется в некоторых родильных домах при поступлении рожениц. Перечень зарегистрированных в Российской Федерации диагностических наборов реагентов для выявления РНК SARS-CoV-2 представлен в Государственном реестре медицинских изделий.
После попадания SARS-CoV-2 в организм иммунная система человека начинает вырабатывать специфические антитела к белкам нуклеокапсида и оболочки вируса – иммуноглобулины (Ig) – важный фактор защиты иммунной системы от инфекции. Выявление антител разных классов в крови является информативным свидетельством текущего или прошлого инфекционного процесса, помогает выявить стадию развития инфекции, а также позволяет оценить иммуногенность вакцин. Для достижения этих целей применяют разные тест системы, разработанные для определения разных сочетаний иммуноглобулинов.
Для определения состоявшейся встречи человека с вирусом и иммунного ответа на инфекцию COVID-19 чаще всего определяют общий пул антител класса М (IgM) и G (IgG), а также иногда IgА. Их наличие указывает на то, что человек инфицирован на момент проведения теста (IgА) или был инфицирован вирусом COVID-19 (IgM и IgG), независимо от того, было ли у него тяжелое или легкое заболевание или даже бессимптомное течение инфекции. Наблюдение за серопозитивностью антител в популяции позволяет получить эпидемиологические данные, оценить степень инфицирования и уровень общей заболеваемости. Антитела класса A (IgA) начинают формироваться и доступны для детекции примерно со 2 дня от начала заболевания, достигают пика через две недели, но долго не сохраняются. Антитела класса M (IgM) вырабатываются примерно на 7-е сутки от заражения, достигают пика через неделю и могут сохраняться в среднем до 6 недель. Примерно со 2-3-й недели или ранее определяются антитела класса G(IgG), которые, как правило, сохраняются в высоких титрах в течение длительного срока – от нескольких месяцев до года. Важно понимать, что не все тесты на антитела IgM и IgG к вирусу SARS-CoV-2, нацеленные на определение состоявшегося инфицирования, предназначены для оценки иммунного ответа на вакцинацию против SARS CoV-2 вакцинным препаратом на основе спайкового белка (S белка) или его компонентов.
Тест-системы нового поколения для детекции антител
Вирус контактирует с клеткой не всей поверхностью, а так называемым рецептор-связывающим доменом (RBD — Receptor-binding domain) спаечного белка. Для проникновения в клетку вирус использует рецептор, роль которого выполняет АСЕ-1 (ангиотензин-превращающий фермент), широко экспрессирующий на поверхности клеток. Свежие исследования показывают, что анти-RBD антитела, вырабатываемые при встрече с коронавирусом, являются вируснейтрализующими. Они нарушают контакт вируса с клеточным рецептором и таким образом блокируют его попадание в клетку. В России для определения вируснейтрализующих анти-RBD антител доступны тест-системы на основе иммуноферментного анализа (ИФА), разработанные Национальным исследовательским центром эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи. Эти тест-системы относятся к тестам нового поколения, так как позволяют среди всех антител класса G выявлять только иммуноглобулины, непосредственно нейтрализующие вирус, и таким образом получить подтверждение сформированного в результате перенесенного заболевания протективного иммунного ответа, способного защитить уже переболевшего от повторного заражения. Точность результатов, полученных при использовании таких тест-систем близка к 100%. Действующая одиннадцатая версия Временных методических рекомендаций Минздрава России «Профилактика, диагностика и лечение новой коронавирусной инфекции (COVID-19)» содержит рекомендацию проводить определение в том числе анти-RBD антител для оценки напряженности поствакцинального протективного иммунитета. Перечень зарегистрированных наборов реагентов представлен в Государственном реестре медицинских изделий.